Определение остатков антибиотиков хинолона в курином мясе с помощью системы массовой спектрометрии жидкой хроматографии LCMS-TQ9200 Wayeal® (LC-MS/MS)
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsКроме того, "GB 31658.17-2021 Национальный стандарт безопасности пищевых продуктов - определение тетрациклинов, Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
Ключевые слова:LC-MS/MS, хинолоны, остатки ветеринарных препаратов, безопасность пищевых продуктов.
Wayeal LCMS-TQ9200 Система жидкой хроматографии-тандемной масс-спектрометрии
Метод жидкой хроматографии
Колонка хроматографии: C18 3,0x100 мм
Мобильная фаза: A: 0,1% метанола муравьевой кислоты, B: 0,1% раствор муравьевой кислоты
Скорость потока: 0,4 мл/мин
Температура колонны: 45°C
Объем инъекции: 3μL
Метод масс-спектрометрии
Таблица 1 Масс-спектрометрия Параметры ионного источника
| Ионный источник |
ESI, режим положительных ионов |
| Напряжение ионного источника |
5500 В |
| Скорость потока газа дезальвации |
18000 мл/мин |
| Скорость потока газа в небулайзере |
2000 мл/мин |
| Скорость потока газа на занавес |
5000 мл/мин |
| Скорость потока газа при столкновении |
800μl/мин |
| Температура растворения |
450°С |
| Температура газа на занавеске |
150°С |
Таблица 2 Параметры масс-спектрометрии для каждого соединения
| Соединения |
Q1 |
Q3 |
Потенциал декластрации (V) |
Энергия столкновения (V) |
| Оксолиновая кислота |
262.1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| Флюмекин |
262.1 |
202 |
115 |
44 |
| 244.1* |
115 |
24 |
| Норфлоксацин |
320.1 |
302.1* |
90 |
27 |
| 233.2 |
90 |
33 |
| Эноксацин |
321.2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| Ципрофлоксацин |
332.2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| Пефлоксацин |
334.1 |
316* |
110 |
29 |
| 233.2 |
110 |
35 |
| Ломефлоксацин |
352.1 |
265.1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| Данофлоксацин |
358.1 |
340.1* |
100 |
32 |
| 283.1 |
100 |
32 |
| Энрофлоксацин |
360.2 |
316.1 |
110 |
27 |
| 245.1* |
110 |
38 |
| Офлоксацин |
362.1 |
318.3 |
75 |
25 |
| 261.2* |
75 |
34 |
| Марбофлоксацин |
363.2 |
72.1* |
100 |
25 |
| 345.2 |
100 |
29 |
| Сарафлоксацин |
386.1 |
299.1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| Дифлоксацин |
400.2 |
299.1 |
110 |
38 |
| 382.2 |
120 |
30 |
Примечание: ион, отмеченный *, является количественным ионом
1Результат эксперимента.
1.1 Форма пика
Определение 13 хинолонных антибиотиков было завершено в течение 11 минут.Все соединения продемонстрировали сильные сигнальные реакции, отвечающие требованиям к экспериментальной количественной оценке.
Рисунок 1 Хроматограмма 13 Квинолонных антибиотиков
1.2- Дальность полета.
Соответствующее количество стандартного раствора с смесью хинолонов разбавлялось в серии для приготовления калибровочных стандартов, охватывающих концентрации от 2 до 500 нг/мл.Оценка линейности показала отличное согласие с номинальными концентрациямиКоэффициент определения (R2) составлял от 0,9921 до 0.9998, подтверждающий удовлетворительную линейность для всех компонентов.
Таблица 3 Таблица линейного диапазона
| Соединения |
Линейный диапазон |
Коэффициент линейной корреляции R2 |
| Оксолиновая кислота |
2-500 нг/мл |
0.9989 |
| Флюмекин |
2-500 нг/мл |
0.9988 |
| Норфлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9968 |
| Эноксацин |
2-500 нг/мл |
0.9989 |
| Ципрофлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9982 |
| Пефлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9992 |
| Ломефлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9921 |
| Данофлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9969 |
| Энрофлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9998 |
| Офлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9941 |
| Марбофлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9997 |
| Сарафлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9946 |
| Дифлоксацин |
2-500 нг/мл |
0.9973 |
Рисунок 2 Результаты линейного диапазона для выбранных антибиотиков хинолонов
1.3Лимит обнаружения (LOD) и лимит количественной оценки (LOQ)
Национальный стандарт безопасности пищевых продуктов GB 31658.17-2021 определяет предельный уровень обнаружения (MDL) 2μg/kg и предельный уровень количественного определения (MQL) 10μg/kg.у всех целевых соединений показано соотношение сигнала к шуму, значительно превышающее 3 при 2μg/kg и 10 при 10μg/kg;, полностью соответствующие требованиям чувствительности, указанным в национальном стандарте.
Таблица 4 Соотношение сигнала к шуму для определения и количественного определения границ целевых соединений
| Соединение |
SNR (S/N) |
| 2μg/kg |
10μg/kg |
| Оксолиновая кислота |
111.26 |
359.11 |
| Флюмекин |
59.64 |
244.73 |
| Норфлоксацин |
70.16 |
392.57 |
| Эноксацин |
23.74 |
80.26 |
| Ципрофлоксацин |
37.91 |
99.26 |
| Пефлоксацин |
28.70 |
125.81 |
| Ломефлоксацин |
48.54 |
165.84 |
| Данофлоксацин |
105.74 |
348.10 |
| Энрофлоксацин |
35.97 |
120.82 |
| Офлоксацин |
51.67 |
287.26 |
| Марбофлоксацин |
190.11 |
399.38 |
| Сарафлоксацин |
38.11 |
160.79 |
| Дифлоксацин |
25.85 |
149.29 |
Рисунок 3 Хроматограммы LOD/LOQ для выбранных хинолонов
1.4- Точное испытание.
Смешанный стандартный раствор хинолонных антибиотиков в трех концентрациях (10, 50 и 100 нг/ мл) вводился 6 раз для сравнения времени ретенции и вариаций пиковой области.Как показано в таблице ниже, все исследованные хинолоновые соединения показали отклонения в времени удержания менее 0, 3% и отклонения в пиковой области менее 5%,полностью соответствующие требованиям национальных стандартов RSD ≤15% для точности.
Таблица 5 Точное испытание различных соединений
Рисунок 4 Точные хроматограммы выбранных соединений
2Заключение.
В этом методе для определения содержания хинолонных антибиотиков в образцах курицы использовалась жидкая хроматография Wayeal LCMS TQ9200 и система тандемной массовой спектрометрии.Экспериментальные данные показали отличную хроматографическую производительность с четко определенными формами пиков и отсутствием хвоста для всех аналитов., при соблюдении требований чувствительности, указанных в национальных стандартах, метод демонстрировал хорошую линейность с коэффициентами корреляции (R2) более 0,99 для всех кривых калибровки,вместе с отличной воспроизводимостью, о чем свидетельствуют отклонения времени удержания ниже 0Анализ трех партий образцов курицы, подготовленных независимо друг от друга, не показал обнаруживаемых остатков антибиотиков хинолона. These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
