Определение семи парабенов в пищевых продуктах с помощью жидкой хроматографии

Парабены (п-гидроксибензоаты), как класс высокоэффективных и широкоспектральных консервантов, широко используются в пищевой промышленности (например, соевый соус, уксус, напитки, джем и т. д.), косметике и фармацевтике. Их антибактериальная эффективность и безопасность напрямую влияют на стабильность продукта и здоровье потребителей. В данном эксперименте используется метод, описанный в стандарте "GB 5009.31-2025 Национальный стандарт безопасности пищевых продуктов — Определение парабенов в пищевых продуктах", с использованием системы высокоэффективной жидкостной хроматографии Wayeal серии LC3500, оснащенной DAD-детектором для анализа.

Ключевые слова: пищевые добавки; парабены; п-гидроксибензоаты; высокоэффективная жидкостная хроматография.

1. Приборы и реагенты

1.1 Список конфигурации высокоэффективной жидкостной хроматографии

Таблица 1 Список конфигурации приборов

1.2 Реагенты и стандарты

Таблица 2 Список реагентов и стандартов

1.3 Экспериментальные материалы и вспомогательное оборудование

Аналитические весы

Ультразвуковая ванна

Вихревой смеситель

2. Методика эксперимента

2.1 Приготовление реагентов

2.1.1 Смешанный стандартный рабочий раствор соединений парабенов: Отберите соответствующий объем смешанного стандартного раствора соединений парабенов и разбавьте его 30% раствором метанол-вода для приготовления смешанных стандартных рабочих растворов с массовыми концентрациями 0,2 мг/л, 0,5 мг/л, 1,0 мг/л, 2,0 мг/л, 5,0 мг/л, 10 мг/л, 20 мг/л и 50 мг/л соответственно.

2.1.2 Подготовка образца:

Взвесьте 5 г (с точностью до 0,01 г) образца в градуированную центрифужную пробирку объемом 50 мл (газированные напитки требуют ультразвуковой дегазации в ультразвуковой ванне в течение 10 минут перед взвешиванием). Добавьте 30 мл раствора метанол-вода (3+7), перемешивайте на вихревом смесителе в течение 3 минут и подвергните ультразвуковому воздействию в течение 20 минут. Затем добавьте раствор метанол-вода (3+7) до общего объема 40 мл. Центрифугируйте при 6000 об/мин в течение 3 минут, отфильтруйте супернатант и возьмите фильтрат для очистки. Активируйте колонку твердофазной экстракции (SPE) последовательно 5 мл метанола и 5 мл воды. Перенесите раствор для очистки в активированную колонку SPE. Промойте колонку последовательно 5 мл воды и 5 мл раствора метанол-вода (3+7), затем элюируйте 6 мл метанола. Соберите элюат, разбавьте до 10 мл водой, отфильтруйте через мембрану и введите в высокоэффективный жидкостный хроматограф для анализа.

3. Результаты эксперимента

3.1 Тестирование пригодности системы

Рис. 1 Хроматограмма стандартного рабочего раствора соединений парабенов

Таблица 3 Результаты испытаний стандартного рабочего раствора соединений парабенов

Тест пригодности системы показывает, что каждый хроматографический пик имеет хорошую форму, высокое число теоретических тарелок, отсутствие помех от окружающих пиков примесей, а значения разрешения все больше 1,5, что соответствует экспериментальным требованиям.

3.2 Тест повторяемости

Рис. 2 Хроматограмма теста повторяемости 1,0 мг/л соединения парабена (6 инъекций)

Таблица 4 Результаты теста повторяемости 1,0 мг/л соединения парабена (6 инъекций)

Тест повторяемости показал, что после шести последовательных инъекций стандартного рабочего раствора соединения парабена с концентрацией 1,0 мг/л повторяемость времени удерживания составила менее 0,2%, а повторяемость площади пика - менее 1,0%, что указывает на хорошую повторяемость.

3.3 Линейный тест

Рис. 3 Хроматограмма теста калибровочной кривой

Линейный тест показывает, что в диапазоне 0,2–50 мг/л кривые смешанных стандартов для семи соединений парабенов демонстрируют коэффициенты линейной корреляции, превышающие 0,9999, что указывает на отличную линейность.

3.4 Тест на точность

Рис. 4 Хроматограмма теста на точность

Таблица 5 Результаты теста на точность соединений парабенов

Тест на точность показал, что восстановление семи соединений парабенов в добавленных образцах варьировалось от 97,6% до 104,8%, что указывает на хорошую точность.

3.5 Тест напитка марки А

Рис. 5 Хроматограмма теста напитка марки А

Тестирование образца показало, что семь соединений парабенов не были обнаружены в напитке определенной марки.

4. Заключение

В данном эксперименте используется метод, описанный в стандарте "GB 5009.31-2025 Национальный стандарт безопасности пищевых продуктов — Определение парабенов в пищевых продуктах", с использованием системы высокоэффективной жидкостной хроматографии Wayeal серии LC3500, оснащенной DAD-детектором для анализа. Результаты эксперимента показывают, что в тесте пригодности системы каждый пик соединения имеет хорошую форму и высокое число теоретических тарелок, что соответствует экспериментальным требованиям. Шесть последовательных инъекций стандартного рабочего раствора парабена с концентрацией 1,0 мг/л показали повторяемость времени удерживания менее 0,2% и повторяемость площади пика менее 1,0%, что указывает на хорошую повторяемость. В диапазоне 0,2–50 мг/л коэффициенты линейной корреляции все превышают 0,9999, что указывает на хорошую линейность. Восстановление семи соединений парабенов в добавленных образцах варьировалось от 97,6% до 104,8%, что указывает на хорошую точность. Восстановление семи соединений парабенов в добавленных образцах варьировалось от 97,6% до 104,8%, что демонстрирует хорошую точность. Семь соединений парабенов не были обнаружены в тестах образцов. Все вышеуказанные данные соответствуют требованиям к прибору, указанным в стандартном методе.